细胞克隆形成实验服务
使用说明书
仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
第1版(2016年04月修订)
【服务内容】
细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。
【项目和周期】
项目内容:
1、取对数生长期的各组细胞,分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞,并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。
2、将细胞悬液作梯度倍数稀释,每组细胞分别以每皿100或200个细胞的梯度密度分别接种含37℃预温培养液的皿中或者6孔板中,并轻轻转动,使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2~3周。
3、经常观察,当出现肉眼可见的克隆时,终止培养。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液,加适量吉姆萨染色液染10~30分钟,然后用流水缓慢洗去染色液,空气干燥。
4、将平皿在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。
克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)×100%。
周期:2~3周
【客户提供的材料】
1.待检测或处理的细胞;如果常见的人和大小鼠细胞系,公司可免费提供。
2.细胞处理的相关药物和实验方案;
【反馈给客户结果】
1、提供相应实验数据和图表;
2、提供具体的实验报告;
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